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本制品是一款是采用TaqMan探针法进行Real-Time PCR的试剂；本制品是将HotStart Taq DNA聚合酶、UDG酶、优化的反应Buffer、dNTPs、保护剂及赋形剂等试剂预混后制成的冻干粉，冻干粉外观颜色均匀，呈块状或海绵团块结构，孔隙致密。仅需加入RNase Free Water即可快速复溶成2×浓度的预混型试剂，进行实验时，加入引物、探针、模板、水即可配制完成PCR反应液。

本制品中引入dUTP/UDG防污染系统，可有效去除体系中存在的污染物，同时当反应体系升温至90～95℃，UDG酶彻底失活，可维持cDNA完整性。

本制品采用特殊工艺制备的HotStartTaq DNA聚合酶并结合特别优化的反应及冻干配方制成的冻干试剂，能有效抑制非特异性反应，提高了反应特异性和扩增效率，能够在更广的范围内进行准确定量。并配有不同浓度的ROX Reference Dye，用于不同仪器校正孔间荧光信号误差。

• 加入RNase Free Water可快速复溶；
  
• 无需冷链运输，可在室温及2～8℃保存；
  
• 高特异性：采用特殊工艺制备的HotStart Taq DNA聚合酶，大大提高了PCR扩增的特异性；
  
• 高效：精心配制的Real-Time PCR专用2×SuperMix，具有更高扩增效率和扩增灵敏度；
  
• 快捷：PCR反应所必需试剂集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。

• 复溶后保存于-20℃，避免反复冻融。
  
• 反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头、Microtube等，避免污染。
  
• 引物设计：一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应，扩增目标序列越短越好，一般为200bp以下。

• 溶解冻干制品
  每支中加入1mL RNase-Free Water溶解冻干品，溶解后的制品为2×浓度；溶解后的试剂可置于-20℃保存，下次实验融化后直接使用即可。
  
• 常用反应体系
  

  成分	用量
  2×探针法qPCR SuperMix(UDG)	10μL
  上游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  下游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  探针（10μM）	0.4μL
  模板	1～2μL
  ROX（需根据机器型号选择）	0.4μL
  RNase-Free Water	至20μL

• 常用PCR循环
  两步法可获得高特异性，三步法可获得高扩增率，根据需求选择扩增程序。
  
  • 两步法扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    50℃	2min	1
    95℃	5min	1
    95℃	10s	45～50
    60℃	40s

  • 三步法PCR扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    50℃	2min	1
    95℃	5min	1
    95℃	10s	45～50
    50～60℃	40s
    72℃	30s

• 用ROX I校准的Real Time PCR仪有：
  ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast；ABI StepOne/StepOnePlus及其他仪器。
  
• 用ROX II校准的Real Time PCR仪有：
  ABI 7500/7500 Fast；ABI ViiA7；ABI Q6；ABI Quant Studio 6/7 Flex；Stratagene MX4000/MX3005P/MX3000P及其他仪器。
  
• 不需要用ROX校准的Real Time PCR仪有：
  Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon 2/Chromo4；Eppendorf Mastercycler ep realplex/realplex 2s；Cepheid SmartCycler；Illumina Eco qPCR；Roche Applied Science LightCycler 480；Thermo Scientific PikoReal Cycler；Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/Rotor-Gene 6000及其他仪器。